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动物体内转染试剂
动物体内转染试剂
英文名称:Transfection Reagent in vivo总访问:4414
国产/进口:进口半年访问:147
产地/品牌:Engreen产品类别:动物试剂
规       格:Entranster-in vivo 最后更新:2019-2-28
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参考报价:2199
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销售商: 北京英格恩生物科技有限公司 查看该公司所有产品 >>
  • 产品介绍
  • 公司简介

 

        EntransterTM-in vivo是英格恩生物公司(Engreen Biosystem Co,Ltd.)最新研发合成的用于动物体内转染的转染试剂。EntransterTM-in vivo动物体内转染试剂可将小片断RNA如siRNA,miRNA,mimic、inhibitor或DNA转染到动物体内,在动物体内进行RNA干扰或蛋白表达实验。
        EntransterTM-in vivo试剂不是病毒,改变了病毒转染方法复杂、周期长、不稳定、花费大、安全性等诸多问题。EntransterTM-in vivo转染效率高,方法简单,无需病毒包装,直接将DNA或RNA送入目的细胞的细胞核中表达。
EntransterTM-in vivo,非脂质体,采用纳米技术合成,通过保护和浓缩核酸,避免核酸被体液破坏,并通过物理作用将核酸富集在细胞表面,增强核酸进入细胞组织,从而产生作用。EntransterTM-in vivo能耐受体内复杂的环境,不产生免疫反应。
应用范围
专用于动物体内转染,可直接转染DNA或RNA到动物体内进行:
基因治疗的动物体内研究
RNA干扰的动物体内研究
蛋白功能的动物体内研究
主要特点
最快3天可以得到结果,核酸+转染试剂,注射动物,完成转染。
肝、肾、心、肺,血液系统、神经系统...成功应用。
可方便、快捷更换不同的小片断RNA或DNA进行动物试验。
方法先进,抛弃病毒,众多实验室应用,稳定可靠。
比使用病毒节省90%以上费用,时间缩短到3天!

方法简单

如图1所示,只需要将核酸和转染试剂分别稀释,混合,无需过滤,即可直接注射动物。

转染效果     

        将EntransterTM-in vivo与Ambion in vivo siRNA(作用于凝血因子VII)和阴性siRNA通过尾静脉注射成年小鼠,2天后,取动物肝脏检测。在mRNA水平和蛋白水平观察干扰效果。见上图,图中最左侧组为对照组注射阴性siRNA为3mg/kg,后边3组为每kg动物注射阳性siRNA量分别为1mg/kg,2mg/kg和3mg/kg情况。

 

各器官转染

     根据推荐用量注射EntransterTM-in vivo和siRNA(作用于Lamin A/C)和阴性siRNA到成年小鼠。注射后2天收集相应的组织,分离RNA,用qRT-PCR分析Lamin A/C基因的表达水平。图4为尾静脉结果,图5为各器官分别局部注射结果。

 
 
应用本产品部分文献:

1.Plos one, 2016 March 9. MiR-3162-3p Is a Novel MicroRNA That Exacerbates Asthma by Regulating β-Catenin.( MiR-3162-3p通过调控β-链蛋白从而加剧哮喘的发作)

2.Arthritis Rheumatol, 2016 Apr. In Vivo Therapeutic Success of MicroRNA‐155 (miR‐155) Antagomir in a Mouse Model of Lupus Alveolar Hemorrhage.(miR‐155拮抗剂体内成功治疗狼疮性肺泡出血模型的小鼠)

3.Int J Clin Exp Patho, 2016, March 15. Regulation of ZNF580 in pathogenesis of ischemic cerebrovascular disease accompanied with upregulation of Smad2 and ADNP( 在伴随着Smad2和ADNP上调缺血性脑血管病的发病机制中ZNF580的调节)

4.Med Sci Monit. 2016 Apr 7. MiR-206 Attenuates Denervation-Induced Skeletal Muscle Atrophy in Rats Through Regulation of Satellite Cell Differentiation via TGF-β1, Smad3, and HDAC4 Signaling.(miR-206通过TGF-β1、Smad3和HDAC4信号调控卫星细胞分化进而减弱大鼠骨骼肌萎缩)

5.Oncotarget, 2015 April 20. Macrophages promote benzopyrene-induced tumor transformation of human bronchial epithelial cells by activation of NF-κB and STAT3 signaling in a bionic airway chip culture and in animal models.(巨噬细胞通过在仿生气道芯片培养和动物模型的κB和STAT3信号通路的活化从而促进苯并芘诱导的人支气管上皮细胞肿瘤的转化)(IF:6.359 )

6.Hepatology, 2015 JUL 3. MicroRNA-125b attenuates epithelial-mesenchymal transitions and targets stem-like liver cancer cells through small mothers against decapentaplegic 2 and 4.((MicroRNA-125b通过small mothers减少Dpp2和4以减弱上皮细胞-间充质细胞转化并作用于肝癌细胞干细胞)(IF: 11.711.)

7.Critical Care Medicine, 2015, June 27. Cyclophilin A/Cluster of Differentiation 147 Interactions Participate in Early Brain Injury After Subarachnoid Hemorrhage in Rats.(大鼠蛛网膜下腔出血早期亲环蛋白A/CD147相互作用)(IF: 7.422.)

8.Cellular and Molecular Life Sciences, 2015 June 26. Rab5-mediated VE-cadherin internalization regulates the barrier function of the lung microvascular endothelium.(高危大鼠角膜移植片排斥中CD25siRNA基因转移作用)(IF: 5.808.)

9.Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol, 2015 May 31. Effects of CD25siRNAgene transfer on high-risk rat corneal graft rejection.(高危大鼠角膜移植片排斥中CD25siRNA基因转移作用)

10.Brain behavior and immunity, 2015 April 29. MicroRNA let-7c-5p protects against cerebral ischemia injury via mechanisms involving the inhibition of microglia activation.(MicroRNA let-7c-5p通过抑制小胶质细胞活化防止脑缺血损伤) (IF: 5.889.)

11.Basic Research in Cardiology, 2015 April 10, 110:28. Sialyltransferase7A, a Klf4-responsive gene, promotes cardiomyocyte apoptosis during myocardial infarction.(Sialyltransferase7A,一个Klf4的应答基因,在心肌梗死中促进心肌细胞凋亡)(IF: 5.414.)

 
欢迎垂询英格恩:

电话:010-68489824-8002

QQ:2991151091

Email:  market@engreen.com.cn

网址:www.engreen.com.cn

 
一 产品介绍
英格恩生物公司(Engreen Biosystem Co, Ltd.)是专业的转染试剂研发生产厂商。EntransterTM是英格恩生物公司研发合成的纳米聚合物转染试剂,该试剂采用纳米技术合成,是最新一代非病毒转染试剂。由于纳米技术的应用,EntransterTM-in vivo在细胞转染过程中,表现了卓越的低毒、高效的性能。本品用于RNA的体内转染,可用于如下研究:
基因治疗的动物体内研究
RNA干扰的动物体内研究
蛋白功能的动物体内研究
本品显著的特点是方法简单、快捷,对动物没有明显的炎性反应,对操作者安全。
二 使用前注意
1.RNA剂量。核酸尾静脉给药的起始剂量为2.5mg/kg。推荐剂量为5mg/kg,还可以到7.5mg/kg以上。一般给药剂量越高,效果越好,以不造成动物炎症和死亡为标准。下表是一些常见的给药剂量和体积。
表1 给药剂量和体积
给药途径
核酸用量
最大给药体积
尾静脉
50-150μg
200μl-600μl
脑室
1-2.5μg
5μl
腹膜
100μg
0.6ml-1ml
成年小鼠
睾丸
3-5μg
10μl
裸鼠
皮下肿瘤
10-50μg
100μl
脑室
2-5μg
20μl
成年大鼠
尾静脉
500μg -2.25mg
1-2ml
成年兔
肺,气管灌注
300-700μg
300-700μl
Tips:一般情况下,对21nt双链siRNA oligo来说,1 OD duplex=3.0 nmols=40 μg。但也有一些公司合成的双链siRNA oligo,1 OD duplex=33μg,具体请咨询相关合成公司。
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北京英格恩生物科技有限公司 网址:www.engreen.com.cn
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技术支持:010-68489824 转 8003 技术支持 Email:support@engreen.com.cn
2.核酸的要求。建议用纯水溶解,并且要高纯度和无内毒素。核酸的浓度建议在1-4μg/μl。用非纯水(如PBS)稀释的核酸可能会造成沉淀。核酸的纯度会极大影响转染效率,一定要采用高纯度高质量核酸。
3. EntransterTM-in vivo的用量。一般情况下,核酸(μg)和EntransterTM-in vivo (μl)按照1:0.5的比例使用。
4.稀释液。用葡萄糖溶液稀释,并使葡萄糖的终浓度为5%。下表是采用5mg/kg情况下,尾静脉注射20g体重小鼠,注射量为400μl时各成分组成(核酸浓度1μg/μl)。
表2 400μl转染复合物的组成
100μl (100μg)核酸
100μl的10%葡萄糖溶液
核酸稀释液
纯水0μl补足
50μl转染试剂
100μl的10%葡萄糖溶液
400μl转染复合物
转染试剂稀释液
纯水50μl补足
三 操作步骤
下面以100μg的核酸与50μl转染试剂,总注射体积400μl,20g小鼠尾静脉注射为例说明。
1. 核酸的稀释。将100μg核酸用适量无内毒素纯水稀释成1μg/μl,加入10%葡萄糖溶液(w/v)100μl,使葡萄糖终浓度为5%,终体积为200μl,充分混匀。
2. 转染试剂的稀释。取50μl的EntransterTM-in vivo试剂用100μl的10%葡萄糖溶液稀释,并用纯水50μl补足,得到葡萄糖终浓度为5%,终体积为200μl液体,充分混匀。
3. 转染复合物形成。立即将稀释后的转染试剂加入到稀释后的核酸溶液中,立即充分振荡混匀。
4. 室温静置15分钟。配制好的转染复合物请即配即用,不宜长期存放。
5. 动物注射。
6. 基因表达检测。一般来说,根据注射方法和靶器官的差异,12-48小时后基因表达效果较好。
7. 长期给药。一次给药的持续时间一般为1-2周,如果需要维持长期效果,可以采用多次注射的方法。注射频度一般为一周一次,也可以根据实验要求缩短或适当延长。

 

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