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猪主要急性期蛋白(MAP)检测试剂盒的操作步骤
点击次数:336 发布日期:2018-12-28  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负
猪主要急性期蛋白(MAP)检测试剂盒的操作步骤:

1、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

2、温育:用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。

3、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

4、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此

重复5次,拍干。

5、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

6、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

10 分钟.

7、终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

8、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
来源:上海抚生实业有限公司
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